Amyloïde A-testkit

Een amyloïde A Testkit detecteert serumamyloïde A in menselijk serum in vitro. Deze test is een uitstekende niet-specifieke ontstekingsindicator, omdat het niveau van amyloïde A-eiwit scherp stijgt tijdens inflammatoire, infectieuze of niet-infectieuze aandoeningen. Dit eiwit is ook aanwezig in het bloed van mensen die lijden aan diabetes, atherosclerose of chronische nierziekte. Amyloïde A-assaykits zijn verkrijgbaar bij een aantal fabrikanten.

Amyloïde A is een acutefasereactie-eiwit

Acute-fasereacties worden gekenmerkt door een toename van plasma-eiwitten. Deze veranderingen beginnen binnen enkele uren of dagen na het begin van de meeste weefselschade en houden enkele dagen of weken aan. De belangrijkste reactanten in de acute fase zijn serumamyloïde, stollingsfactoren en transporteiwitten. De minder belangrijke reactanten in de acute fase omvatten fibrinogeen, haptoglobine en ceruloplasmine. Elk van deze eiwitten heeft zijn eigen biologische en klinische waarde.

In het serum zijn SAA-eiwitten in de acute fase multifunctionele apolipoproteïnen die een rol spelen bij het cholesteroltransport, het metabolisme en de immunologische reacties. Deze eiwitten worden geïnduceerd door pro-inflammatoire cytokines en kunnen in concentraties tot wel 1000 keer toenemen. Een chronische verhoging van serumamyloïde A-eiwitten is een voorwaarde voor secundaire amyloïdose, een fatale en progressieve ziekte waarbij de afzetting van onoplosbare plaques in de weefsels het primaire symptoom is.

Het lichaam produceert deze eiwitten om de aangeboren afweer tegen infecties te versterken. Te veel productie kan echter tot ernstige problemen en zelfs shock leiden. Bovendien kunnen sommige APR's schadelijke gevolgen hebben voor de gezondheid. Amyloïde A is een voorbeeld van een acutefasereactie-eiwit. Opnieuw zal dit artikel de soorten APP’s bespreken en de rol die ze spelen in vaccins. Zodra u meer over APR's begrijpt, kunt u beter beslissen hoe u ze in de toekomst gaat gebruiken.

Het wordt gedetecteerd door ELISA

De ELISA-test voor serumamyloïde A (SAA) meet het niveau van dit acute-fase-eiwit in menselijk serum. De ELISA-kit maakt gebruik van een strip-well-formaat om het niveau van amyloïde A in menselijk serum te meten. De kit bevat reagentia voor maar liefst 96 tests. Amyloïde A wordt geassocieerd met reumatoïde artritis en sarcoïdose.

Het ELISA-protocol voor de detectie van amyloïde A is door verschillende onderzoeken gevalideerd. ELISA-metingen onder 110 pg/ml hadden geen enkele correlatie met die van SIMOA. Bovendien hadden de Ab1-40-metingen een vloereffect waardoor de datapunten afweken van de Passing-Bablok-regressiecurve. Deze slechte commutabiliteit is duidelijk zichtbaar in de Bland-Altman-plots.

Momenteel zijn er twee soorten ELISA's beschikbaar voor het detecteren van amyloïde A in menselijk serum. De ene is een op papier gebaseerde ELISA, terwijl de andere een formaat met 96 putjes gebruikt. De door Millipore gebruikte ELISA detecteert amyloïde b40 in hersenvocht. De test is zeer gevoelig en heeft een gevoeligheid van meer dan 96%.

Commerciële ELISA-kits voor amyloïde A zijn verkrijgbaar bij EUROIMMUN in Lübeck, Duitsland. Prototype SIMOA Amyblood-testen zijn ook beschikbaar. Beide gebruiken dezelfde monoklonale antilichamen, die binden aan residuen 1-4 van het Ab-peptide. Tijdens de tests is TMB recht evenredig met de concentratie o-Ab. Deze methode maakt een snelle en nauwkeurige bepaling van de niveaus in menselijke urine mogelijk.

Het wordt gebruikt om de niveaus van serumamyloïde A te kwantificeren

De methode die wordt gebruikt voor de meting van serumamyloïde A (SAA) is een zeer gevoelige en specifieke test. Voor de test is als standaardmonster zes µl menselijk serum of plasma nodig. De gevoeligheid van deze test is 0,5 ng/ml met een dynamisch bereik van 1,56-100 ng/ml. Het wordt vervaardigd door Crystal Chem, een wereldberoemde fabrikant van ELISA-kits.

Hoewel de directe rol ervan in de procoagulatie niet duidelijk is, is serumamyloïde A een bruikbare biomarker voor coronaire hartziekte. In één onderzoek werd de relatie onderzocht tussen serum-amyloïde A en weefselfactor-routeremmer. Het wordt nu beschouwd als een onafhankelijke biomarker voor coronaire hartziekte. Ondanks het bewijs voor dit verband zijn er echter geen grootschalige klinische onderzoeken uitgevoerd.

Deze test maakt gebruik van anti-SAA-antilichamen om serum-amyloïde A-niveaus te detecteren. De cellen die zijn gekleurd met de anti-SAA-antilichamen hebben hoge niveaus van SAA. Cellen gekleurd met SAA vertonen bruine kleuring. In RA-weefsel wordt het eiwit tot expressie gebracht door synoviale vasculaire endotheelcellen en perivasculaire gebieden. Bij artrose is de SAA-expressie echter laag. De SM bevat fibroblastachtige synoviale cellen.