Een hoogwaardige adenosinedeaminasetestkit

Adenosine Deaminase (ADA) is een natuurlijk enzym dat betrokken is bij de immuunrespons. De functie van adenosinedifosfaat (ADP) is het activeren van de cellen en het uitvoeren van membraanpermeabilisatie en cytotoxisch effect. Adenosine is geïdentificeerd als een van de belangrijkste aminozuren die nodig zijn voor normale menselijke hersenactiviteit. Het wordt gesynthetiseerd door de lever en wordt via acties van het immuunsysteem in het bloedplasma gedistribueerd. Adenosinedifosfaat is een drager van het antivirale genetische materiaal. In Biomedical Expo zal de ADA Activity Assay Kit worden gebruikt in combinatie met het eerder genoemde BioVision Cytokine.

Adenosinedifosfaat (ADP) is een drager van de T-lymfocytgroeifactor. In de BioVision Cytokine wordt adenosinedeaminase (ADO) uit de ontlede nier geëxtraheerd en geanalyseerd met behulp van een in de handel verkrijgbare spectrofotometrische geautomatiseerde test. Het reagens werd voorbehandeld met anti-fosfo-dGlucose (PI) om de reactie ervan met de analyt te voorkomen.

De samenstelling van de in de handel verkrijgbare AIDA Activity Assay Kit omvat twee hoofdcomponenten: het reagens en de laboratoriumapparatuur. De reagentia in de Aida Activity Assay Kit omvatten een gezuiverde enzymcocktail (Sigma-FCA). De laboratoriumapparatuur bestaat uit een microplaatscanner (gemonteerd achter een glazen microscoopglaasje), glaswerk, een boek met standaardcurveresultaten en een spoelfles. Vóór gebruik moeten de monsters van de Aida Activity Assay Kit worden gewassen met gedechloreerd water. Het gebruik van reagens en laboratoriumapparatuur is niet beperkt tot uitsluitend laboratoriumtests.

Om het vermogen van de Aida Activity Assay Kit om de totale adenosinedeaminase-activiteit te meten te onderzoeken, werden verschillende experimentele sessies uitgevoerd. De eerste sessie bestond uit vier dagen handmatig traceren. Honderdvijftig microliter Aida-GFP werd opgelost in leidingwater en gemengd met fosfaatgebufferde zoutoplossing. Na twintig minuten werden de monsters getest op het HPLC-massabalansscherm.

De tweede sessie omvatte twee extra dagen handmatige tracering. Monsters werden gedurende twee uur op de curvecassette geïnjecteerd, zoals hierboven beschreven. De derde sessie omvatte drie extra dagen handmatige tracering in dezelfde kamer, gevolgd door vier uur subcutane injecties met adenosinedeaminase (ADCA). Het bloedmonster werd na een uur afgenomen voor analyse.

Voor het speekselonderzoek werd vijfhonderd microliter standaardoplossingen van deaminase en pH-waarde gemengd in een niet-steriele punch. De varkens mochten naar wens een hele reeks vloeistoffen drinken, van gewoon water tot light frisdrank. Toen de standaardoplossingen hun kookpunt bereikten, werd een druppelaar met een vooraf bepaald volume speeksel ingebracht en werd de adenosinedeaminase-activiteit gemeten.

De laatste groep van zes monsters werd geanalyseerd met behulp van een in de handel verkrijgbare op speeksel gebaseerde Phosphorimidazoleamine Assay Kit (Saproflavil; Thermo Instruments). Bij deze reeks tests werd een enkele druppel fosforimidazoolamine/speeksel-ada-reagens gemengd met een volume kraanwater en werd het gedroogde poeder aan de monsters toegevoegd. Na dertig minuten werd een tweede monster van hetzelfde monster genomen. In dit geval werd de activiteit in het speeksel onmiddellijk gemeten. De kit was speciaal ontworpen voor het meten van de activiteit van het zuur in menselijk speeksel. Zoals verwacht kon er een aanzienlijke hoeveelheid activiteit worden gedetecteerd.

Zoals verwacht produceerden beide analysers vergelijkbare resultaten. Het zeer specifieke karakter van de Salivary-Positron Emission Tomography (SPECT)-analyse, samen met de zeer gevoelige methodologie (hoge intra-orale vloeistofdetectie) resulteerde in een consistent hoge nauwkeurigheid en significante metingen. Het laboratoriumpersoneel dat voor de procedures werd ingezet, waren allemaal experts op dit gebied. Er was geen bewijs van besmetting of enige vorm van experimentfout. De proefpersonen gaven geïnformeerde toestemming en de procedure volgde de aanbevelingen van de American Association of Clinical Endocrinologists. Over het geheel genomen vertoonden de resultaten verkregen met de Adenosine Deaminase Assay Kit een goede reproduceerbaarheid, wat werd bevestigd door afzonderlijke onderzoeken van onafhankelijke klinische laboratoria.